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酶法分析技術(shù)在食品行業(yè)的應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間: 2019-03-27  點(diǎn)擊次數(shù): 1389次

 目前,酶法分析技術(shù)已經(jīng)在我國(guó)被廣泛應(yīng)用,如在蔬菜、食品、果汁、乳業(yè)、酒業(yè)、糖業(yè)、飼料、發(fā)酵、制藥、調(diào)味品等加工生產(chǎn)中作為產(chǎn)品質(zhì)量控制、成品質(zhì)量檢驗(yàn)及加工、制藥等工藝工程研究分析的主要手段,藥物研發(fā)機(jī)構(gòu)中作為產(chǎn)品質(zhì)量控制和生產(chǎn)過(guò)程監(jiān)控的手段。這主要是因?yàn)樗兄僮骱?jiǎn)單,快速準(zhǔn)確,特異性強(qiáng),能夠定量分析檢測(cè)的顯著特點(diǎn),得到世界很多國(guó)家的認(rèn)可,并且被多個(gè)國(guó)家寫入法規(guī)。
    隨著科學(xué)技術(shù)日新月異的發(fā)展,目前市場(chǎng)上推出了一種液體裝即用型酶法分析試劑盒,與以往的干粉酶法試劑盒相比,這種試劑盒有著以下顯著的特點(diǎn):一是所有試劑均為液體劑型,即時(shí)可用,不需溶解和配制,克服了上一代普通干粉裝試劑盒的一些缺點(diǎn):如部分試劑(如酶或NADP)是凍干粉,使用前要先溶解,使用后要冷凍保存,尤其是保質(zhì)期僅為2-3個(gè)月,每次檢測(cè)樣品前要先融化,這樣不僅降低酶的活性,而且影響酶促反應(yīng)和檢測(cè)準(zhǔn)確度;推出新一代的液體裝即用型試劑盒不存在這些問(wèn)題,而且核心的酶也是液體型的,不需冷凍保存,可直接使用,保質(zhì)期達(dá)到12月以上,檢測(cè)的穩(wěn)定性和重復(fù)性大大提高,三是液體裝即用型試劑盒可以采用儀器進(jìn)行自動(dòng)化檢測(cè),有效減少試劑用量,增加測(cè)試數(shù),成倍降低檢測(cè)成本。以上特點(diǎn),便使液體裝酶法分析試劑盒取代普通干粉試劑盒有著不可逆轉(zhuǎn)的優(yōu)勢(shì)。
    隨著酶法應(yīng)用的標(biāo)準(zhǔn)化,酶法分析在貿(mào)易中變得尤為重要。而在我國(guó),目前標(biāo)準(zhǔn)水平總體來(lái)說(shuō)偏低,所以我們有必要去借鑒上已經(jīng)成熟的標(biāo)準(zhǔn)體系。《貿(mào)易技術(shù)壁壘協(xié)議》明確規(guī)定:一切需要有技術(shù)規(guī)則或標(biāo)準(zhǔn)的地方,締約方均應(yīng)以這些的技術(shù)規(guī)則或標(biāo)準(zhǔn)作為制訂本國(guó)技術(shù)規(guī)則或標(biāo)準(zhǔn)的依據(jù)。這也是我們出口商品的需要。

在以下的標(biāo)準(zhǔn)及法規(guī)中,大量的酶法檢測(cè)方法被采用和推廣:
ISO ( 標(biāo)準(zhǔn)組織)

ISO 2963(1997) 乳酪的化學(xué)分析方法:乳酪及乳酪加工品中的檸檬酸濃度的測(cè)定(酶法).ISO 4133(1979) 肉及肉制品中葡萄糖酸內(nèi)酯濃度的測(cè)定(相關(guān)方法)
ISO 4134(1999) 肉及肉制品中L-谷氨酸濃度的測(cè)定(相關(guān)方法)ISO 8069(1986) 無(wú)水牛奶及無(wú)水牛奶制品中乳酸及乳酸鹽的測(cè)定
ISO 8451(1991) 番茄中淀粉濃度的測(cè)定(酶法)ISO 11213(1995) 改良淀粉中乙?;鶟舛鹊臏y(cè)定(酶法)
ISO 13965(1998) 肉及肉制品中淀粉及葡萄糖濃度的測(cè)定(酶法)ISO/DIS 5765-1 奶粉,冰淇淋粉及乳酪加工品中乳糖濃度的測(cè)定,酶法檢測(cè)乳糖中葡萄糖的濃度
ISO/DIS 5765-2 奶粉,冰淇淋粉乳酪加工品中乳糖濃度的測(cè)定,酶法檢測(cè)乳糖中半乳糖的濃度 

 

AOAC (美國(guó)化學(xué)分析聯(lián)合會(huì))

 

AOAC Official 牛奶中乳糖的測(cè)定 Method 984.15 (酶法)   

AOAC Official 酒中葡萄糖及果糖的測(cè)定 Method 985.09(酶法)

AOAC Official 酒中檸檬酸測(cè)定 Method 985.11 (酶法)     

AOAC Official 蘋果酸中L-蘋果酸比例的測(cè)定 Method 993.05 (酶法)

 

IFU (果汁生產(chǎn)者協(xié)會(huì))

IFU 21 L-蘋果酸的測(cè)定 (酶法), 1985   

IFU 22 L-檸檬酸的測(cè)定 (酶法), 1985   

IFU 22 乙醇的測(cè)定型 (酶法) 1996

IFU 53 D/L-乳酸的測(cè)定 (酶法),1996   

IFU 54 D-異檸檬酸的測(cè)定 (酶法),1984   

IFU 55 葡萄糖的測(cè)定 (酶法), 1985

IFU 55 果糖的測(cè)定 (酶法), 1985   

IFU 56 蔗糖的測(cè)定 (酶法), 1998   

IFU 62 山梨醇的測(cè)定 (酶法),1995

IFU 64 D-蘋果酸的測(cè)定 (酶法),1995   

IFU 66 乙酸的測(cè)定 (酶法),1996   

IFU 76 葡萄汁中D-葡萄糖酸的測(cè)定,2001

IFU 77 葡萄汁中甘油的測(cè)定,2001 starch enzymatic recommended

 

OIV (酒業(yè)協(xié)會(huì))

葡萄糖及果糖的測(cè)定(酶法)   

甘油的測(cè)定 (酶法)

L-/D-乳酸的測(cè)定 (酶法)

檸檬酸的測(cè)定 (酶法)

L-蘋果酸的測(cè)定 (酶法)

D-蘋果酸的測(cè)定 (酶法)

 

IDF (乳品委員會(huì))

IDF 34C(1992) 乳酪,乳酪加工品及牛奶中檸檬酸的測(cè)定(酶法)    

IDF 69B(1987) 無(wú)水牛奶中D-/L-乳酸的測(cè)定(酶法)

IDF 79B(1991) 乳酪加工品,乳清粉中乳糖及D-半乳糖的測(cè)定(酶法)  

IDF 79B(1991) 無(wú)水牛奶,無(wú)水冰淇淋混和物有乳清粉中乳糖及D-葡萄糖的測(cè)定(酶法)

IDF 97A(1984) 牛奶制品及乳清粉中硝酸鹽/(硝酸根)的測(cè)定(酶法)    

IDF 175(1995) 牛奶中乳糖/D-葡萄糖的測(cè)定(酶法)

 

EBC (歐洲啤酒釀造公約)

低酒精度啤酒及無(wú)酒精度啤酒中乙醇的測(cè)定(酶法)   

啤酒中硝酸鹽的測(cè)定(酶法)   

啤酒中總二氧化硫的測(cè)定(酶法)

啤酒中乙酸的測(cè)定(酶法)

啤酒中甘油的測(cè)定 (酶法)

啤酒中乳酸的測(cè)定 (酶法)

 

MEBAK (Mitteleuropaische Brautechnische Analysenkommission-Central European Brewing Committee for Analysis)

ASBC Methods of Analysis (American Societ of Brewing Chemists)

低酒精度啤酒的檢測(cè)(酶法) (方法)—頒布日期 1991年

 

ICUMSA (糖制品標(biāo)準(zhǔn)方法委員會(huì))

ICUMSA method GS 2/3-35 精制糖制品中亞硫酸鹽的測(cè)定(酶法)

ICUMSA method GS 8/1/2/3/4-19 總α-半乳糖酶及蜜三糖的測(cè)定(酶法)

ICUMSA method GS 8/4/6-4 甜菜汁中葡萄糖及果糖的測(cè)定(酶法)

ICUMSA method GS8/4/6-13 乳酸的測(cè)定(酶法)

ICUMSA method GS8/4/6-14 甜菜汁中乙酸的測(cè)定(酶法)

European Norms (歐盟成員國(guó)均執(zhí)行此標(biāo)準(zhǔn))

EN 1137 (1995) 水果汁及蔬菜汁中檸檬酸(鹽)含量的測(cè)定:NADH 分光光度法

EN 1138 (1995) 水果汁及蔬菜汁中L-蘋果酸(鹽)含量的測(cè)定: NADH 分光光度法

EN 1139 (1994) 水果汁及蔬菜汁中D-異檸檬酸含量的測(cè)定: NADH 分光光度法

EN 1140 (1995) 水果汁及蔬菜汁中D-果糖含量的測(cè)定: NADH 分光光度法

EN 1988 (1998) 亞硫酸鹽的測(cè)定 (酶法)

EN-ISO 8069(2001) 無(wú)水牛奶中乳酸及乳酸鹽含量的測(cè)定    

EN-ISO11213(1995) 改良淀粉中乙酰基含量的測(cè)定(酶法)

EN 12014-3(1998) 肉制品中硝酸鹽及/或亞硝酸鹽含量的測(cè)定(用酶還原硝酸鹽為亞硝酸鹽,而后用分

光光度計(jì)檢測(cè))

EN 12014-5(1998) 含蔬菜的嬰幼兒食品中硝酸鹽及/或亞硝酸鹽含量的測(cè)定(酶法)

EN 12138 (1998) 水果及蔬菜汁中D-蘋果酸含量的測(cè)定NAD 分光光度法.

EN 12146 (1997) 水果及蔬菜汁中蔗糖含量的測(cè)定NADP 分光光度法

EN 12631 (1999) 水果及蔬菜汁中D-乳酸及L-乳酸(鹽)含量的測(cè)定NAD 分光光度法

EN 12632 (1999) 水果及蔬菜汁中乙酸(鹽)含量的測(cè)定NAD 分光光度法.    

EN -ISO13965 肉及肉制品中淀粉及葡萄糖含量的測(cè)定(酶法)

 

DIN (German Norms - additional not covered by EN)

DIN 10325 (1986) 乳酪制品中檸檬酸的測(cè)定(酶法)    

DIN 10326 (1986) 牛奶及牛奶制品中蔗糖及葡萄糖的測(cè)定(酶法)

DIN 10344 (1982) 牛奶及牛奶制品中乳糖及半乳糖的測(cè)定(酶法)   

DIN 10335 (1987) 牛奶及牛奶制品中D-/L-乳酸的測(cè)定(酶法)

DIN 10381 (1979) 淀粉及淀粉制品中D-葡萄糖及D-果糖的測(cè)定(酶法)   

DIN 10471 (1997) 牛奶及牛奶制品中D-葡萄糖酸的測(cè)定(酶法)

DIN 10476 (2000) 牛奶制品中硝酸鹽及亞硝酸鹽的測(cè)定(酶法)    

DIN 54604-1 (1988) 紙及紙板中淀粉的測(cè)定(酶法)  

  

    涉及的檢測(cè)樣品種類包括各類蔬菜、水果及加工品、啤酒、白酒、葡萄酒及其他飲料;各種糕點(diǎn)、面包類食品、巧克力、各種糖、肉食及各類加工發(fā)酵食品;各類奶及奶制品、蜂蜜、調(diào)味品、發(fā)酵產(chǎn)品及其他生物樣品、動(dòng)物飼料等等。具體項(xiàng)目包括L-乳酸、D-乳酸、D/L-乳酸、乙酸、L-抗壞血酸、L-谷氨酸、D-蘋果酸、L-蘋果酸、異檸檬酸、檸檬酸、乙醇、尿素/氨、膽固醇、β-羥丁酸、葡萄糖酸、葡萄糖/果糖、蔗糖/葡萄糖/果糖、葡萄糖、乳糖/半乳糖、麥芽糖、甘油、淀粉、L-肉堿、甘露醇、丙酮酸、酮體、可溶性纖維、游離SO2、鐵、銅、總SO2和亞硫酸鹽等物質(zhì)等。

 

已經(jīng)應(yīng)用的產(chǎn)品包括:

產(chǎn)品名稱及用途 檢測(cè)物質(zhì)
D-葡萄糖檢測(cè)試劑盒 D-Glucose Enzymatic Test kit (F)  葡萄糖
D-葡萄糖/D-果糖檢測(cè)試劑盒 D-Glu/D-Fru/Sucrose Enzymatic Test kit(F)葡萄糖/果糖
D-葡萄糖/D-果糖/蔗糖檢測(cè)試劑盒D-Glu/D-Fru Enzymatic Test kit(F)葡萄糖/果糖/蔗糖
乳糖/半乳糖檢測(cè)試劑盒Lactose/Galactose Enzymatic Test kit(F)乳糖/半乳糖
甘露醇檢測(cè)試劑盒 D-Mannitol Enzymatic Test kit (F) 甘露醇
L-蘋果酸檢測(cè)試劑盒 L-Malic acid Enzymatic Test kit(F)L-蘋果酸
乙酸檢測(cè)試劑盒 Acetic acid Enzymatic Test kit(G)乙酸
L-乳酸檢測(cè)試劑盒 L-Lactic acid Enzymatic Test kit(F)L-乳酸

 

D/L-乳酸檢測(cè)試劑盒 D/L -Lactic acids Enzymatic Test kit(F)D/L-乳酸
D-葡萄糖酸檢測(cè)試劑盒 Gluconic acid Enzymatic Test kit(F)D-葡萄糖酸
甘油檢測(cè)試劑盒 Glycerol Enzymatic Test kit(F)甘油
乙醇檢測(cè)試劑盒 Ethanol Enzymatic Test kit(F)乙醇
氨檢測(cè)試劑盒 Ammoniac Enzymatic Test kit(F)
淀粉檢測(cè)試劑盒 Starch Enzymatic Test kit(F)淀粉
膳食纖維檢測(cè)試劑盒Total Dietary Fiber(F)(AOAC方法)膳食纖維
尿素-氨檢測(cè)試劑盒Urea-ammoniac Enzymatic Test kit(F)尿素-氨
丙酮酸檢測(cè)試劑盒Pyruvic acid Enzymatic Test kit(F)丙酮酸
檸檬酸檢測(cè)試劑盒Citric acid Enzymatic Test kit(G)檸檬酸
L-肉堿檢測(cè)試劑盒L-Carnitine Enzymatic Test kit(G)肉堿
酮體檢測(cè)試劑盒Ketonic bodies Enzymatic Test kit(F)酮體
Sulfite Colorimetric Test kit亞硫酸鹽檢測(cè)試劑盒亞硫酸鹽
Free  SO2 Colorimetric Test kit游離SO2檢測(cè)試劑盒游離SO2
Totle SO2 Colorimetric Test kit總SO2檢測(cè)試劑盒總SO2
Iron Colorimetric Test kit鐵檢測(cè)試劑盒重金屬鐵
Copper Colorimetric Test kit銅檢測(cè)試劑盒重金屬銅
Tartric acid Colorimetric Test kit(F) 酒石酸檢測(cè)試劑盒酒石酸
pH Colorimetric Test kit(F) 酸堿度檢測(cè)試劑盒酸堿度
Total acidity Colorimetric Test kit(F) 總酸度檢測(cè)試劑盒總酸度
Primary Amino Nitrogen Colorimetric Test kit(F) 氨基酸態(tài)氮檢測(cè)試劑盒氨基酸態(tài)氮(PANOPA)

 

    此外,在葡萄酒行業(yè)相當(dāng)發(fā)達(dá)的歐洲,葡萄酒的檢測(cè)也是經(jīng)常用到的。法國(guó)柏桑特公司就這方面專門組織研發(fā)力量研制出了葡萄酒檢測(cè)試劑盒(包括蘋果酸、乳酸、葡萄糖/果糖、酒石酸),并且在法國(guó)本地葡萄酒行業(yè)的生產(chǎn)和質(zhì)控已被廣泛采用,有效提高了葡萄酒加工生產(chǎn)中產(chǎn)品質(zhì)量控制、成品質(zhì)量檢驗(yàn)和蘋乳發(fā)酵過(guò)程中酸的監(jiān)測(cè)效率。尤其是重復(fù)使用這類檢測(cè)試劑盒在這些不同的生產(chǎn)過(guò)程中可確保符合成本效益的生產(chǎn)高品質(zhì)的產(chǎn)品。在我國(guó),酒類行業(yè)檢測(cè)還相當(dāng)落后,各個(gè)關(guān)鍵過(guò)程及控制點(diǎn)的控制不嚴(yán)格,在加上我國(guó)的標(biāo)準(zhǔn)混亂,致使我國(guó)酒業(yè)很難與接軌。為了促進(jìn)我國(guó)葡萄酒健康發(fā)展,幫助企業(yè)建立生產(chǎn)過(guò)程監(jiān)控體系,北京泰樂(lè)祺科技優(yōu)先公司引進(jìn)了法國(guó)柏桑特(BioSenTec) 公司研發(fā)的葡萄酒酶法分析試劑盒,為國(guó)內(nèi)葡萄酒生產(chǎn)企業(yè)在蘋乳發(fā)酵等生產(chǎn)葡萄酒過(guò)程提供新的監(jiān)控手段。該產(chǎn)品均為全液體裝即用型產(chǎn)品,值得一提的是該品不僅適用于快速檢測(cè)葡萄酒、果汁有機(jī)酸、糖類物質(zhì)的含量,還可用于果汁生產(chǎn)中的檢測(cè),適合于手動(dòng)和自動(dòng)化使用。

 

以下是此次引進(jìn)產(chǎn)品列表:

葡萄酒蘋果酸檢測(cè)試劑盒 Malic Acid Enzymatic Test kit (F)蘋果酸
葡萄酒乙酸檢測(cè)試劑盒 Acetic Acid Enzymatic Test kit (F)乙酸
葡萄酒葡萄糖/果糖檢測(cè)試劑盒 Glucose / Fructose Enzymatic Test kit (F)葡萄糖/果糖
葡萄酒L-乳酸檢測(cè)試劑盒 L-Lactic Acid Enzymatic Test kit (F)L-乳酸

 

 

    在過(guò)去很長(zhǎng)的一段時(shí)間里,由于我國(guó)的技術(shù)法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)過(guò)低,實(shí)驗(yàn)技術(shù)相對(duì)落后,一方面,已成為制約我國(guó)產(chǎn)品出口的瓶頸。由于技術(shù)壁壘的提高,我國(guó)出口企業(yè)不同程度遭遇國(guó)外技術(shù)壁壘的限制。受國(guó)外技術(shù)性貿(mào)易措施影響較大的農(nóng)、食行業(yè)損失嚴(yán)重。近年來(lái)美國(guó)、日本和歐盟等國(guó)家和地區(qū)不斷制定更嚴(yán)格和更廣泛的標(biāo)準(zhǔn),我國(guó)農(nóng)產(chǎn)品對(duì)這些國(guó)家的出口難度在加大。另一方面,由于我國(guó)相當(dāng)一部分農(nóng)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)低于標(biāo)準(zhǔn),有的甚至沒(méi)有具體的技術(shù)要求,在對(duì)進(jìn)口農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí),只進(jìn)行極為普通的一般項(xiàng)目衛(wèi)生檢驗(yàn),其他國(guó)家不合格的產(chǎn)品因符合我國(guó)的標(biāo)準(zhǔn)就可以堂而皇之地進(jìn)入中國(guó)市場(chǎng),很難起到有效保護(hù)國(guó)內(nèi)產(chǎn)業(yè)的作用。 
    他山之石,可以攻玉。隨著經(jīng)濟(jì)一體化進(jìn)程的加快,我們更應(yīng)借鑒發(fā)達(dá)國(guó)家先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn),制定和應(yīng)用相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn),盡快建立起完備的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)體系,筑起保護(hù)市場(chǎng)和消費(fèi)者利益的“質(zhì)量長(zhǎng)城”。

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