食用油中黃曲霉毒素B1檢測方案

繼蒙牛乳制品黃曲霉毒素M1超標(biāo)之后，廣東省三家公司生產(chǎn)的部分產(chǎn)品被檢出致癌物質(zhì)黃曲霉毒素超標(biāo)。近期，深圳市場監(jiān)督部門隨后也在當(dāng)?shù)貦z出7批次食品黃曲霉毒素超標(biāo)，并發(fā)現(xiàn)餐飲服務(wù)行業(yè)仍舊存在使用問題油現(xiàn)象。

黃曲霉毒素業(yè)已成為一個困擾食品業(yè)界的廣泛問題。民以食為天，食品安全是關(guān)系到千家萬戶，關(guān)系到食品企業(yè)存亡的關(guān)鍵，食用油中黃曲霉毒素B1含量超標(biāo)，源自花生原料霉變，可能是花生在種植、運輸及儲存過程中因天氣濕熱發(fā)霉，造成黃曲霉、寄生曲霉等生長繁殖。黃曲霉毒素是一種致癌物質(zhì)，其毒性是氰hua鉀的10倍，pi霜的68倍。黃曲霉毒素的毒性要在加工溫度超過280℃時才可以破壞，一般的烹飪方法沒辦法去除掉，唯有在源頭杜絕黃曲霉毒素的污染才是最佳的解決之道。

對黃曲霉毒素B1的定量，在之前的相關(guān)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中有明確規(guī)定，其中：玉米、花生仁、花生油中不得超過20ug/kg;大米和其他食用油類不得超過10ug/kg;其他糧食、豆類、發(fā)酵食品不得超過5ug/kg;嬰兒代乳食品不得檢出黃曲霉毒素B1。作為國內(nèi)專業(yè)從事霉菌毒素檢測技術(shù)與產(chǎn)品服務(wù)的供應(yīng)商， 2010年泰樂祺科技投資成立了"檢測應(yīng)用實驗室"，重點關(guān)注食品安全事件尤其是涉及霉菌毒素安全等問題，以期快速提出解決方案。

泰樂祺科技現(xiàn)針對近期出現(xiàn)的食用植物油中黃曲霉毒素超標(biāo)問題，提出以下解決方案。

免疫親和柱＋KRC光化學(xué)柱后衍生法

1. 簡介

Pribofast黃曲霉毒素總量免疫親和柱可選擇性吸附樣品液中的毒素，從而對毒素樣品起到非常針對性的純化作用，然后用HPLC/FLD＋KRC柱后衍生系統(tǒng)可以有效的測定黃曲霉毒素 B1、B2、G1、G2濃度，提高檢測的準(zhǔn)確性和靈敏度。

2. 免疫親和柱/KRC衍生法特點：

PriboFast 黃曲霉毒素總量（B+G）免疫親和柱{加標(biāo)回收>90%}

· 特異性很強使得樣品凈化效果很好；

· 使用免疫親和柱操作架可以使樣品凈化快速，提高檢測效率高
l  · HPLC＋FLD+KRC柱后衍生化，有效提高檢測靈敏度，實現(xiàn)較低的檢測限 (黃曲霉毒素B1 0.05ppb)。
l  · 衍生化操作方便，光化學(xué)衍生化無需使用衍生試劑（通常電化學(xué)柱后衍生均需要使用衍生試劑，分析成本高，操作麻煩，儀器故障率較高）。

· 回收率高，達(dá)到90％以上。

3. 免疫親和柱法操作步驟簡介：

1） 樣品處理（植物油脂）

· 準(zhǔn)確稱取試樣25.0 g 于250mL具塞錐形瓶中

· 加人5g 氯化鈉及加入甲醇/水，以均質(zhì)器高速攪拌提取2min；

· 定量濾紙過濾，并準(zhǔn)確移取15 M l濾液并加入30mL水稀釋混勻；

· 用玻璃纖維濾紙過濾1-2次，至濾液澄清，備用。

2）將回溫的免疫親和柱安裝在泵流操作架進(jìn)行過柱凈化：經(jīng)過Pribofast黃曲霉毒素B1免疫親和柱（IAC-011-3）活化、淋洗、洗脫三步驟，洗脫下來的溶液可直接用于HPLC檢測；

3）測定：HPLC直接進(jìn)樣，經(jīng)黃曲霉毒素專用色譜柱、KRC光化學(xué)柱后衍生化后熒光檢測器直接記錄黃曲霉毒素B1濃度；

Pribofast KRC 柱后衍生器和 HPLC參數(shù)（符合GB23212-2008）

Pribofast KRC－25 柱后光化學(xué)衍生器     波長：254 nm
HPLC-色譜柱 ：黃曲霉毒素專用色譜柱150 x 4.6 mm; C-18
流動相: 甲醇/水  (45/ 55  v/v)
流量：1.0 mL/min                 柱溫： 30 °C
進(jìn)樣體積：  20μL
熒光檢測器： λ-激發(fā)波長： 365 nm        λ-發(fā)射波長： 440 nm

液相色譜儀檢測配置

高效液相色譜儀帶有熒光檢測器

Pribofast KRC－25 柱后光化學(xué)衍生裝置，含有1ml反應(yīng)池，納米燈管254nm

黃曲霉毒素專用色譜柱 C18 150 x 4.6 mm